Nevím odkud, ale v hlavě mám 1 g pepsinu na 1000 ml 0,1 N roztoku HCl, nicméně v článku, který mám uložený, píše Händel (1993) 1 g pepsinu, 100 ml vody, 1 ml koncentrované HCl. Možná bych zkusil nejdřív variantu s menším množstvím pepsinu, a až když to nepůjde, tu koncentrovanější (1 g pepsinu, píše autor, rozloží 3 kg bílkovin). Brouky vložíme přímo do roztoku a počkáme jeden den nebo několik málo dnů. Optimální reakční teplota je 37 °C, funguje to ale i v pokojové teplotě. Princip spočívá v tom, že pepsin v kyselém prostředí a při teplotě (zhruba) lidského žaludku štěpí bílkoviny (možná výše zmíněný neuspokojivý účinek hyadázy byl zapříčiněn nevhodnou teplotou nebo nevhodným pH — Hali+ nepíše nic o tom, že by přidával kyselinu).
Varování pro náhodné kolemjdoucí bez chemických znalostí:
Kyselinu ředíme tak, že ji v malém množství pomalu a opatrně necháme stékat po skleněné tyčince do studené vody. Ředěním se roztok samovolně zahřívá. Nikdy nelejeme vodu do kyseliny, hrozí potom stříkání, prskání, bolestivě rozleptaná kůže, popáleniny a díry v oděvu. Ochranné brýle jsou samozřejmostí. Koncentrovaná ("kouřící") kyselina solná je silná žíravina, její výpary poleptají i dýchací cesty, pozor na to, podle množství kyseliny resp. intenzity poleptání může být poleptání dýchacích cest i smrtelné. Koncentrace 0,1 N HCl je hodně zředěná, odpovídá zhruba žaludečním šťávám člověka a kdo si vzpomíná, jak se naposledy poblil, tak si možná vzpomíná též na to, že i taková slabá koncentrace kyseliny solné dokáže nepříjemně podráždit dýchací cesty, jestliže člověk jen malinko zvratků vdechne.
Jako alternativu jsem někde četl, že prý na rozvlhčení cvičících brouků funguje i obyčejný prací prášek ve vodě. Ten taky obsahuje nějaké enzymy, štěpící bílkoviny (kdyby tomu tak nebylo, flek od guláše by nešel vyprat...).
Händel J. 1993: Aufweichverfahren für Insekten. PDF
Preparace lihového materiálu
-
- Příspěvky: 1569
- Registrován: 31 pro 2013, 21:20
- Bydliště: Co pnou se modré hory
- Radomír
- Příspěvky: 1515
- Registrován: 05 srp 2010, 10:16
Re: Preparace lihového materiálu
Podobný návod je:
WOLF J. 1944: Mikroskopická technika. Vesmír, Praha.
WOLF J. 1944: Mikroskopická technika. Vesmír, Praha.
- Hali+
- Příspěvky: 4763
- Registrován: 03 kvě 2010, 06:53
- Bydliště: Pardubice
Re: Preparace lihového materiálu
Hledal jsem doma toho Wolfa, ale jak opravuju byt, tak se k části knihovny nedostanu, je někde v zarovnaných bednách. Ale koukám, že už jsi ho Rado dohledal.
Podle něj jsem to kdysi míchal a fungovalo to. Jen je potřeba toho rozpouštět maličko, protože roztok velmi brzy přestává být účinný a je lepší si to míchat po nějaké době znovu.
V PC jsem dohledal aspoň ten článek, co sem už dával jako odkaz Vindobon:


V PC jsem dohledal aspoň ten článek, co sem už dával jako odkaz Vindobon:
Haliplidae, Byrrhidae, Clambidae a rod Hydrophilus (svět); E-mail: milanb@seznam.cz
-
- Příspěvky: 180
- Registrován: 02 kvě 2010, 15:59
Re: Preparace lihového materiálu
Na preparaci lebek savců kostrováním existuje přípravek Bělotrofix,na preparaci trofejí ho používám,do vody se nasype určené množství přípravku podle návodu,vloží se lebka a zahřívá se na 80-90 °C,nesmí se vařit.Po 15-30 minutách to zcela rozloží svalovinu.Na brouky jsem to nezkoušel.Funguje to na bázi enzymů,které rozkládají bílkoviny.
- Hali+
- Příspěvky: 4763
- Registrován: 03 kvě 2010, 06:53
- Bydliště: Pardubice
Re: Preparace lihového materiálu
Bez kyseliny by to bohužel nefungovalo, pepsin pracuje pouze při nízkém pH. Pamatuji se, že jsem to kdysi na výšce přeléval v nějaké digestoři a pak ještě jednou opatrně doma na dvorku... Pak jsem od Pepsinu raději upustil, přesně z důvodu nebezpečnosti jak píšeš. I když hlavní důvod byl možná ten, že už nešel volně sehnat v lékárně.
Haliplidae, Byrrhidae, Clambidae a rod Hydrophilus (svět); E-mail: milanb@seznam.cz
- Radomír
- Příspěvky: 1515
- Registrován: 05 srp 2010, 10:16
Re: Preparace lihového materiálu
Překlad pro lenivé.
Hmyz se umístí do kapaliny. Menší druhy můžeme preparovat po třech až čtyřech dnech. Zvýšení teploty na 37 °C značně urychlí proces měknutí. Delší setrvání v roztoku broukům neškodí a pěkně se očistí. Tato kapalina je účinná a velmi ekonomická. Roztok lze použít několikrát a lze jej dlouhodobě skladovat v chladničce. Pokud se však velmi zakalí nebo zhnědne, je třeba ji zlikvidovat.
- Radomír
- Příspěvky: 1515
- Registrován: 05 srp 2010, 10:16
Re: Preparace lihového materiálu
Brouky máčím v roztoku pepsinu přesně podle návodu. I po 14 dnech při teplotě cca 35 °C (na radiátoru) - nic moc. Jsou o poznání méně lomiví, ale pružnost zůstává. Nezkoušel někdo trypsin a nebo prací prášky, jak je výše uvedeno?